"

临沂莱谋商贸有限公司

  • <nav id="6u4m2"><nav id="6u4m2"></nav></nav>
  • "
    游客,欢迎您! 请登录 免费注册 忘记密码
    您所在的位置:首页 > 技术中心 > 技术支持 > 正文

    液氮罐冻存样品的方法与注意事项

    作者:天驰液氮罐 来源:原创 日期:2014-08-09 11:31:04 人气:1784 加入收藏 标签:液氮罐冻存 液氮罐冻存样品

      液氮罐冻存样品的方法 :(以独立样品pc12为例)

      1、选择处于对数生长期的细胞。一般长约为70%-80%即可冻存,细胞数目过少或过多都不宜冻存,因为复苏后细胞生存率会降低;收集细胞24小时前换液一次。

      2、用培养液直接将细胞消化下来,离心,1000转, 5min;

      3、吸去上清,在离心管中加入冻存液,(冻存液配制按照60%已过滤的培养基 + 10%DMSO+ 10%胎牛血清+20%马血清配置冻存液(其中DMSO要自己配置), 4度保存备用。),加入冻存液后吹散计数,控制细胞悬液密度为5*106或1*107左右(不过有人建议其实不必要细胞计数,根据细胞的多少,估计一下一瓶细胞冻存几支就行了,细胞密度高一点比较好,操作时间短,对细胞损伤小。), 细胞悬液以1ml的量分装入冻存管中(每个冻存管添加不超过1-1.5m),在冻存管上标记冻存日期,姓名以及细胞种类。选择进口的冻存管;

      4、要严密封口,慢冻过程(1.先将冻存管放入4℃冰箱,约1H。 2.接着置于-20℃冰箱,约40min-1h。 3.置于-80超低温冰箱中放置过夜。 4.置于液氮罐中长期保存。) , 注意将冻存管竖立于合适大小的不锈钢饭盒中,应避免冻存管倒立。

      液氮罐冻存样品的注意事项:

      1、使用DMSO前,不需要进行高压灭菌,它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构,以至于降低冷冻?;ばЧ?。在常温下,DMSO对人体有害,故在配制时好戴上手套操作。使用前将DMSO4度冻一下,对细胞的毒性会减少。

      2、不宜将冻存细胞放置在0℃~-60℃这一温度范围内过久,低温损伤主要发生在这一温度区内,是“危险温区”。

      3、注意定期检查液氮罐内液氮量,及时添加。

      4、多余的冻存液可以4度保存备用。

    本文网址:http://www.seanconneryfan.com/zhichi/828.html
    读完这篇文章后,您心情如何?
    • 0
    • 0
    • 0
    • 0
    • 0
    • 0
    • 0
    • 0
    上一篇: 10升液氮罐参数
    亚博体彩app
  • <nav id="6u4m2"><nav id="6u4m2"></nav></nav>